男生说的p站是啥,贴吧里的P站是神马意思
2023-10-05 19:51:11
跑胶是什么意思,westernprotein中跑胶是什么意思?
要做western,第一个步骤就是用聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)来分离蛋白,这个过程就是跑胶。因为蛋白是混合物,通过凝胶电泳(跑胶)以后,可以把不同分子量大小的蛋白分开,分子量大的蛋白涌动的慢,分子量小的泳动得快,就在胶上显出条带。然后再把胶上分离开的蛋白再转移到膜上,才能进行抗体后续杂交等工作,检测有没有目标的蛋白条带。如果不进行电泳分离,蛋白都混在一起,就没法知道是不是含有目标蛋白了。
westernblot是蛋白印迹,一种用于通过特异的抗原抗体反应检测蛋白的表达量的实验方法;简言之,是蛋白和蛋白之间的杂交;你说的proteinblot哪里有提到的,文献中一般都说westernblot,我猜可能是指western,你可以看看有没用到一抗、二抗,
WB跑胶的意思是:压缩胶电压:80V(10mA);分离胶电压:120V(20mA)当溴酚兰指示剂到达凝胶底部时,即停止电泳。
蛋白样品的制备:通过有机溶剂或水溶法制备总蛋白。
做胶:检测抗原10-30kd,用15%分离胶;30-100kd,用10%分离胶;100-200kd,用7.5%分离胶。
转膜:目的蛋白分子80-140kDa时,胶浓度8%,转移时间为1.5-2小时;目的蛋白分子25-80kDa时,胶浓度10%,转移时间为1.5小时;目的蛋白分子15-40kDa时,胶浓度12%,转移时间为0.75小时;目的蛋白分子<20kDa时,胶浓度15%,转移时间为0.5小时。
后壳封胶是指模具中产品成型位置不能跑胶。
密封胶是指随密封面形状而变形,不易流淌,有一定粘结性的密封材料。是用来填充构形间隙、以起到密封作用的胶粘剂。
具有防泄漏、防水、防振动及隔音、隔热等作用。通常以沥青物、天然树脂或合成树脂、天然橡胶或合成橡胶等干性或非干性的粘稠物为基料,配合滑石粉、白土、炭黑、钛白粉和石棉等惰性填料,再加入增塑剂、溶剂、固化剂、促进剂等制成。
可分为弹性密封胶、液体密封垫料和密封腻子三大类。广泛用于建筑、交通运输、电子仪器仪表及零部件的密封。
如果你切的是PCR产物的两端,那么跑胶是看不出来区别的。选择这样只是因为方便,酶切的效率要取决于保护碱基、酶的质量等等,一般根据经验切完之后,挖胶回收,如果产物带很特异的话,直接PCR产物回收也可以(方便),都可以达到纯化的目的,这也就是你说的意义了。
碰到酶切效率不高的情况,我们会先把目的片段克隆到T载体上,然后再切T载体,跑胶回收。
这样就可以清晰的看到被切下来的目的片段,麻烦一些,但是很确定。
试下降低模版浓度、减少循环次数,或是升高Tm值、增加引物特异性.拖带可能是以下原因:
1:电压太高2:你的胶浓度太低3:非特异扩增4: 回收时操作有问题,造成片段部分降解,所以条带弥散;
就是跑电泳,因为分子实验中,跑电泳要用琼脂糖凝胶制作胶板从而让样品在胶板上产生电泳,所以简称“跑胶”上相的意思是:那个人拍照拍得很好看,比真人还好看。反过来,不上相就是真人比照片好看。 相机曝光时间是指从快门打开到关闭的时间间隔,镜头的光圈叶片在这一段时间内,物体可以在底片上留下影像,曝光时间是看需要而定的,没有长短好坏的说法只有需要的讲法。比如你拍星星的轨迹,就需要很长的曝光时间(可能是几个小时),这样星星的长时间运动轨迹就会在底片上成像。如果你要拍飞驰的汽车清晰的身影就要用很短的时间(通常是几千分之一秒)。曝光时间长的话进的光就多,适合光线条件比较差的情况。曝光时间短则适合光线比较好的情况。曝光越快,进光量越小,曝光越慢,进光量越大。所以曝30秒是为了将光投射到照相感光材料的感光面上,快门所要打开30秒的意思。视照相感光材料的感光度和对感光面上的照度而定。爆光时间就是指快门速度,速度越快,进光量越小,快门越慢,进光量越大。
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